水中葉綠素a檢測方法有哪些（水質(zhì)葉綠素a檢測步驟介紹）

葉綠素a是估算浮游植物生物量的重要指標，可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量，掌握水體的初級生產(chǎn)力情況和富營養(yǎng)化水平。

水中葉綠素a檢測方法有哪些？

1.分光光度法

分光光度法屬于光度法的一種，該分析方法采用的原理是物質(zhì)分子對光具有選擇吸收的特性。葉綠素a的最大吸收峰位于663nm，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度與濃度符合朗伯-比爾定律，可根據(jù)吸光度-濃度之間的線性關(guān)系，計算葉綠素a的濃度。

2.熒光光譜法

葉綠素分子被紫外光照射后可發(fā)射出特征紅色熒光，其熒光強度與葉綠素濃度呈正比，據(jù)此可釆用熒光法進行葉綠素a的定量分析。3.色譜法高效液相色譜(HPLC)法是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、醫(yī)藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域的分析手段。使用高效液相色譜法測定葉綠素a時，需要破壞測定藻類的原樣，前處理方法與分光光度法的前處理方法相似。

3.遙感監(jiān)測

水質(zhì)遙感監(jiān)測是通過監(jiān)測一定波長范圍內(nèi)的水體輻射值，定量分析水體反射光譜特征與水質(zhì)指標間的關(guān)系，進而構(gòu)建水質(zhì)指標反演算法的一類方法體系。遙感技術(shù)測定葉綠素a近年來已經(jīng)被國內(nèi)外許多學(xué)者證實具有監(jiān)測范圍廣、速度快、成本低和便于進行長期動態(tài)監(jiān)測的優(yōu)勢。

 

水質(zhì)葉綠素a檢測步驟介紹：

1.過濾

在過濾裝置上裝 還玻璃纖維濾膜，根據(jù)水體的營養(yǎng)狀態(tài)確定取樣體積，用量量筒量取一定量的混勻樣品，進行過濾，最后用少量蒸餾水沖洗慮器壁。

2.研磨

將樣品濾膜放置于研磨裝置中，加入 3~4mL丙酮溶液，研磨至糊狀。補加3~4mL丙酮溶液，繼續(xù)研磨，并重復(fù)1~2次，保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細胞提取液轉(zhuǎn)移至玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵，一并轉(zhuǎn)移入離心管中，定容至10Ml。

3.浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分震蕩混勻后，用鋁箔包好，放置于4攝氏度下避光浸泡提取2小時以上。

4.離心

將離心管放入離心機，以3000~4000r/min的速度離心10min，然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液待測。

5.空白試樣的配置：

用實驗用水按照與試樣的制備相同的步驟進行實驗室空白試樣的制備。

6.測定：

將試樣轉(zhuǎn)移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測吸光度，測定葉綠素a含量。

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